Optimering av cellodlingsmedia genom kombinering av designade stamlösningar : med experimentell design och multivariat dataanalys

Sammanfattning: Syftet med projektet är att ta fram en metod för optimering av cellodlingsmedia som kan minska den tid och de resurser som dagens metoder kräver. Fem stamlösningar med adekvata komponenter designas och kombineras med olika flödeshastigheter till ett medium. Kombinationerna testas med experimentell design och analyseras med multivariat dataanalys för att få fram optimerade cellmedia. Odlingsmetoden som de fem stamlösningarna anpassas till är fed-batch, ett system där en av lösningarna är en baslösning och de resterande fyra designas till feedlösningar. De senare tillsätts i olika hastigheter till baslösningen anpassat efter cellernas näringsbehov. Strategin som har lagts upp för att designa stamlösningarna bygger på förhållandet mellan komponenternas förbrukningshastighet i de olika tillväxtfaserna. Under odlingen befinner sig cellerna i olika tillväxtfaser, i den exponentiella fasen ökar celldensiteten och i den stationära fasen sker större delen av produktionen av till exempel specifika antikroppar. Komponenterna i baslösningen förbrukas inte, eller i så liten mängd att de inte behöver tillsättas under odlingen, till skillnad från komponenterna i feedlösningarna som behöver tillsättas för att inte utarmas. I den exponentiella celltillväxtfasen, är behovet av de olika feedlösningarna flera gånger större än i den efterföljande stationära fasen. När önskad celldensitet är uppnådd så minskas flödeshastigheten från feedlösningarna och cellerna går in i stationärfas för att ge maximal produktion av önskad produkt. Projektet är uppbyggt av fyra delar: En litteraturstudie av nuvarande metoder för mediumutveckling, en beskrivning av framtagna stamlösningar, optimering av flödeshastigheten med experimentell design och multivariat dataanalys samt ett laborativt arbetsflöde av medias tillverkningsprocess.