Advanced control of chromatography systems for automated analysis of monoclonal antibodies

Sammanfattning: Nedströmsprocesser för rening av biologiska läkemedel som monoklona antikroppar rör sig från batch-processer till kontinuerliga, och vidare till helt automatiska, kontinuerliga nedströmsprocsser. En del av visionen för automatiska reningsprocesser är möjligheten att automatiskt analysera från olika steg av reningen. Orbit är ett program som tillåter advancerad styrning av ÄKTA kromatografisystem för rening av proteiner från Cytiva. I kombination med ett ytterligare program som heter Satellite CDS kan Orbit även kontrollera HPLC-system från Agilent Technologies. I detta examensarbete kopplades en ÄKTA Explorer till injektionsloopen på en Agilent HPLC för att bilda ett dubbelsystem med syftet att förbereda prov för analysis, samt att utföra analys. ÄKTA Explorern samlade prov och förberedde det om nödvändigt. HPLC-maskinen var utrustad med en kolonn som separerade beroende på molekylens storlek för att kunna analysera bildandet av aggregat i antikroppslösningen. Två körningar av Orbit användes för att styra och länka dessa två system och experiment utfördes för att testa funktionaliteten. Syftet med examensarbetet var att testa möjligheten för automatisk analys och för att detta system ska vara fullt funktionellt behövs en metod för att säkra att provet i HPLC-loopen har samma koncentration som originalprovet. Detta är viktigt för en reprensativ analys. Några lösningar till problemet kan vara att använda mer prov, vilket ger en större pool, eller en detektor vid HPLC-loopen. För ytterligare framtida arbete kan denna analytiska system integreras i en nedströmsprocess för rening av antikroppar.