OPTIMERING AV EN INDIREKT ELISA FÖR DETEKTION AV AUTOANTIKROPPAR VID JUVENIL IDIOPATISK ARTRIT

Sammanfattning: Juvenil idiopatisk artrit (JIA) är en autoimmun reumatisk sjukdom som drabbar barn före 16 års ålder. Den vanligaste varianten är oligoartikulär JIA, vilket innebär att den påverkar två till fyra leder med symptom så som svullnad, ömhet, stelhet, rodnad eller nedsatt motorik. Oligoartikulär JIA är även associerad med uveit, vilket är en autoimmun ögonsjukdom som förstör synen. Sjukdomen är i nuläget dåligt förstådd och forskning behövs för att kunna identifiera markörer som kan användas för diagnostik. Enzymkopplad immunadsorberande analys (ELISA) är inom vårdens laborativa arbete en mycket vanlig metod för att undersöka patienters serum och identifiera specifika markörer som tyder på sjukdom. En ELISA kan utföras på olika sätt beroende på om den letar efter antigen eller antikroppar. Syftet med denna studie var att optimera en indirekt ELISA för detektion av autoantikroppar och genomföra en metodjämförelse med en redan väl undersökt kulbaserad autoantikroppsmetod. Studien omfattar 14 serumprov från olika patienter och använder sig av rekombinant framställda protein epitope signature tag (PrEST)-antigener för att identifiera autoantikroppar. PrEST-antigener består av ett humant variabelt proteinsegment och en protein-tag som består av ett albuminbindande protein (ABP) med en N-terminal HIS-tag (His6ABP). För att förhindra ospecifik inbindning till His6ABP-delen av PrEST-antigenerna så framställdes His6ABP, med vilket serum inkuberades innan de undersöktes med ELISA. Då resultatet tolkades binärt kunde stor likhet ses mellan de två olika metoderna för samtliga PrEST-antigener som undersöktes, vilket innebär att metoden kan fortsätta utforskas. Resultatet visade också att His6ABP-delen skulle kunna orsaka korsreaktivitet, vilket dock inte är något negativt för metodens validitet.